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Peprotech细胞因子其他常见问题

2021-06-22
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其他常见问题

● Peprotech细胞因子的稳定性如何? 

除特殊说明之外,Peprotech的细胞因子或重组蛋白均以冻干粉形式提供,这使得细胞因子或重组蛋白在室温条件下便非常稳定。尽管如此,还是建议将细胞因子或重组蛋白置于-20℃-80℃储存,可稳定数年。

重悬后的细胞因子或重组蛋白,在4℃条件下可短期储存1-2周左右的时间,具体请参考具体产品的COA。若要长期储存,需使用含载体蛋白的溶液稀释已重悬的细胞因子或蛋白,分装后请置于-20℃-80℃储存。为避免蛋白部分变性,在冻存期间请避免重复冻融循环。


● PeproTech细胞因子的内毒素水平如何? 

PeproTech大部分无动物成分级别细胞因子的内毒素水平均保证低于0.01 ng/µg蛋白,即0.1 EU/µg蛋白。对于大多数非无动物成分级别的细胞因子,内毒素水平保证低于0.1 ng/µg蛋白,即1 EU/µg。事实上许多细胞因子的实际内毒素含量均低于说明书上标注的内毒素水平。


● ED50units/mg均用来表示比活性(specific activity),两者之间有什么关联? 

ED50的定义是可诱导50%最大反应的细胞因子浓度,而比活性(specific activity)是单位重量蛋白样品中所含的活性单位。比活性单位(Specific Activity Units)只能用于表示蛋白的效能,且仅适用于剂量反应曲线为S形的蛋白。以ng/ml为单位的ED50和以units/mg为单位的比活性之间的换算公式为:
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● 比活性单位(specific activity units)和活性的国际单位(International Units)之间有什么关联?

比活性单位和国际单位(IU)之间没有直接的关联,不能相互换算。

国际单位(IU)是与国际标准品的活性单位(IU/ng)比对后得出的活性数值,后者是在世界卫生组织(WHO)领导的国际合作研究中确定的。WHO国际标准品由英国国家生物制品检定所(NIBSC)制备和提供。

简单地与国际标准品比对而得出的蛋白活性国际单位(IU)常会出现偏差,原因是每个蛋白厂家所用的活性检测方法很难一致,从而导致与国际标准品比对后得到的国际单位(IU)值相互间不具可比性。想要实现真正的可比性,必须建立标准的活性检测方法,以保证所得出的蛋白活性国际单位(IU)值仅与蛋白的质量有关,而与蛋白的来源无关。


● PeproTech是怎样得到蛋白活性的国际单位(IU)值的? 

在可能的情况下,PeproTech通过将自己的产品与对应的WHO标准品在自已的生物活性测试中进行多次平行比对来得出国际单位(IU)值。多次对比可保证我们能够排除因测试本身的不稳定性(如产品批次,使用方法和测试方案等的变异性)而导致的异常值的出现。经多次比对得出的结果可对我们产品的国际单位(IU)值进行可靠的定量。


● 为啥收到Peprotech的细胞因子之后,在产品管中看不到任何蛋白团块或粉末状产品? 

与市场上的许多蛋白产品不同,PeproTech的产品中不含任何载体蛋白和其它添加物(如BSA, HSA和蔗糖等),并且常在最低含盐量的溶液中冻干,结果是微量的蛋白在冻干过程中会沉积在管壁上,形成蛋白薄膜,有时肉眼观察不到。建议在打开管盖前用小离心机快速离心20-30秒,使附着在管盖或管壁上的蛋白聚集于管底。尽管可能看不到蛋白团块,但Peprotech的质控程序保证每管中的蛋白含量准确无误。


● 无动物组分(Animal Free, AF)重组蛋白和普通科研级别(RUO)重组蛋白的区别

无动物组分(AF)的细胞因子或重组蛋白与普通科研级别(RUO)的细胞因子或重组蛋白相比在蛋白生物活性及氨基酸序列上是完全一致的,最主要的区别是在蛋白的表达细胞及表达体系上。无动物组分的细胞因子或蛋白均为原核表达,在传统表达法的基础上对培养体系进行了改进,在培养过程中不加入蛋白胨或牛血清等动物成分,因此最后所得到的细胞因子或蛋白是不含有任何动物成分的。这使得其在使用过程中不会给培养体系引入动物源的病毒,更适用于体内实验,可保证实验结果的稳定性。具体信息请见下表:

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● 在查找Peprotech细胞因子的过程中,经常有客户会遇到这样的问题,想查找Mouse的某指标产品,但发现官网没有,只能找到人的,例如客户要找Mouse CNTF,却只找到了Human CNTF,此时是否可以使用呢? 

对于这种情况,建议查看官网产品页面所列出的crossreactivity,如下图所示。在Peprotech官网列出的交叉种属中,如果点击交叉种属可以转入参考文献的界面,是已经有客户将该产品应用于该种属发表了文章的种属,可以将其推荐给客户,并且可以售后,例如点击Mouse,会自动转入参考文献界面(如下图)。但是,如果在交叉种属下面没有文献链接的种属,是指蛋白同源性高才会被列举到交叉反应中,要推荐给客户的话,需要提前咨询一下Peprotech的技术,如果厂家经过比对或者经过核实,确定是可以推荐给客户的,那么这个蛋白是有售后的,否则只能建议客户尝试,但不保售后。

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